免疫组化检查常用的方法有哪些

2022-07-26

免疫组化常用方法

1. 免疫荧光
  是最早建立的免疫组织化学技术。先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可进行定量分析。
  2. 免疫酶标法
  免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60年代发展起来的技术。先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是目前Z常用的技术。主要优点是定位准确,对比度好,染色标本可长期保存,适用于光镜、电镜研究等。目前免疫酶标法在病理诊断中广为使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法检测系统等。
  3. 免疫胶体金技术
  是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性没有明显影响。用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,可对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量。特别适合于免疫电镜的单标记或多标记定位。也适合进行光镜观察。

组织或细胞中凡是能作为抗原或半抗原,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用免疫组化法对相应的特异性抗体进行检测。


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